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三色堇主要用播種法進行繁殖。果實為卵形，嫩時彎曲向地，長老時向上直起，種子由青白色變成赤褐色，須在葫果由下垂?jié)u伸直時采收。曬種時要加罩，以防果皮干裂時種子彈失。當年的種子發(fā)芽率高，陳種子發(fā)芽率低。

種子發(fā)芽最適宜溫度為20℃左右，約10天發(fā)芽，幼苗在10-15℃條件下培育約15周可開花。一般在9月份播種，幼苗真葉長到5-6片時進行移植，移植時必須帶土團才易成活。在長江流域地區(qū)冬季可選向陽避風處露地越冬；北方地區(qū)可在冷床中或溫室內越冬。翌春土壤解凍后定植，抽生的枝條進行扦插繁殖。